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用于 DNA 和 RNA 測序的 CleanPlex 擴增子測序

更新時間:2023-12-22      點擊次數(shù):567

CleanPlex ®是一種超可擴展且超靈敏的NGS 擴增子測序技術。它具有高度先進的專有多重 PCR 引物設計算法、極其均勻的多重 PCR 擴增化學物質 和 創(chuàng)新的背景清潔化學物質。它們共同使得 CleanPlex 即用型和定制 NGS 面板能夠突破傳統(tǒng)的基于擴增子和基于混合捕獲的目標富集技術的限制。


功能亮點:

  • 超高的擴增均勻性和超低的PCR背景噪音(更準確的變異調用或更低的測序成本)

  • 單管 3 小時工作流程,手動操作時間最少(輕松自動化)

  • 兼容困難樣品(降解的FFPE DNA、FFPE RNA、cfDNA、cfRNA)和主要測序平臺(Illumina、Ion Torrent、Genapsys、MGI DNBSeq)

  • 高的靈敏度(低至單細胞水平直接擴增*)

  • 出色的面板大小可擴展性,單個多重 PCR 池中的擴增子數(shù)可達 20,000 多個

  • 檢測和分析單核苷酸變異(SNV)、小插入和缺失(Indels)、拷貝數(shù)變異(CNV)、基因融合/剪接變異、基因表達水平、腫瘤突變負荷(TMB)、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI)、內(nèi)部串聯(lián)復制(ITD)等

以下是從 DNA 提取到測序數(shù)據(jù)分析的高級靶向測序工作流程(圖 1)。目標富集和文庫制備工作流程(步驟 2)至關重要,通常決定測序數(shù)據(jù)的質量。


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以下是 CleanPlex DNA 擴增子測序文庫制備的典型工作流程(圖 2)。 CleanPlex DNA 工作流程涉及 3 個簡單步驟,每個步驟包括熱循環(huán)或孵育反應,然后使用磁珠進行文庫純化。簡化的方案僅需 3 小時即可完成。在步驟 1 中,在多重 PCR 反應中擴增感興趣的靶標。在步驟 2 中,引物二聚體、非特異性 PCR 產(chǎn)物和復雜的分子碎片在具有創(chuàng)新和專有 CleanPlex 背景清潔化學的消化反應中被生化去除。在步驟 3 中,通過 PCR 索引反應為文庫添加樣本索引條形碼。輸入材料可以是基因組 DNA 和從 FFPE、新鮮/冷凍組織或血液活檢中提取的 DNA。通過在前面添加逆轉錄步驟,輸入材料也可以是RNA。 (圖3)


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